Avaliação de diferentes métodos de criopreservação de Trypanosoma congolense em nitrogénio liquido

Abstract

Os membros do género Trypanosoma são parasitas comuns dos grandes grupos de vertebrados. Em geral, os trypasomas estão bem adaptados em seus hospedeiros e não causam danos apreciáveis, todavia, o grupo de parasita mamíferos é pouco adaptado, causando comummente doenças – as tripanossomoses. O T. congolense é uma espécie de tripanossoma amplamente distribuída em África e uma das mais prevalecentes, infectando um elevado numero de animais domésticos, por essa razão, tem sido alvo de uma imensa investigação cientifica, o que o torna imprescindível a sua constante disponibilidade nos laboratórios de todos os países que se dedicam ao estudo. Os métodos convencionais para a propagação e preservação de microorganismos parasitais in vitro, ou in vivo, tem algumas limitações que incluem a necessidade de laboratórios, isolamento inicial e a perda de linhagem, contaminação bacteriana e fungica e mudanças nas características originais biológicas e metabólicas. Essas desvantagens podem ser ultrapassadas se o método de o prevenção for a criopreservação, que é uma técnica de conservação em nitrogénio liquido. O propósito do presente trabalho foi de avaliar diferentes métodos de criopreservação de T. congolense em nitrogénio liquido através da combinação dos seguintes factores: velocidade de congelamento (2 e 27,5o C/min), tipo de criprotectores (glicerol, dimetil sulfoxido e polivinilpirrolidona) e concentração de cada crioprotector (8 e 10%) Após o congelamento dos tripanossomas e 25 dias de armazenamento no nitrogénio liquido (-196oC), determinou-se in vivo em murganhos, a eficacia de cada velocidade de congelamento, tipo e concentracao de crioprotector. Os resultados mostram que, apesar de não ter havido diferença significativa entre as duas velocidade testadas, 2oC/min foi bastante eficaz para conservar o T. congolense e que, dos tres crioprotectores avaliados, o glicerol (em ambas concentrações) mostrou um alto efeito de crioprotecção.